第十二章普洱茶抑制胆固醇的吸收与合成功效

一、什么是胆固醇

提到胆固醇，人家都认为这是一种对人体有害的物质。其实，胆固醇对人体具有重要的生理功能，对生命来说是不可缺少的物版。胆固醇是人体许多物质的合成原料。如人体合成的激素，包括皮质激素、性激素与醛固酮等，几乎全是以胆固醇作为原料合成的。可以说，胆固醇是调节机体结构功能与代谢核心物质的核心原料，没有胆固醇就没有人体正常的生命过程。

在人体内，胆固醇主要有两种存在形式， 一种被称为“好胆固醇”，另一种被称为“坏胆固醇”。“好胆固醇”指的是HDL-C,即高密度脂蛋白胆固醇。“坏胆固醇”指的是LDL-C, 即低密度脂蛋白胆固醇。当HDL-C增多时，动脉粥样硬化、动脉血栓形成、心肌梗死以及脑中风的发病率就降低。当LDL-C 增高时，上述事件的发生率就会增高。降低了LDL-C,上述疾患的发生就会减少。“坏脂肪”一LDL-C主要由胆固醇组成，是机体不需要的、剩余的胆固醇，作为“血液垃圾”，正常情况下，会被很快排除到体外。

正因为胆固醇如此重要，所以，人类与动物体内存在充足的保障系统，来保证有足够的胆固醇供人体使用。它的来源远远大于它的排除系统。一条途径是胆固醇的吸收途径，通过摄取吸收食物中的胆固醇保障供给；另一条途径是机体内部合成胆固醇的途径，即肝细胞内部有一整套合成酶体系合成胆固醇。还有—条是“肝肠循环”，即使被排泄到肠道的胆固醇还可以再被机体吸收到达肝脏，这被称为“肝肠循环”。一般来说，影响血液胆固醇含量的主要来源为：食物、肝脏合成以及肝肠循环。

 

二、胆固醇过多对人体有什么危害

当LDL-C在血液内过度积聚时，LDL-C 被挤而靠近血管壁，有些则被血管内皮细胞“吃掉”（endocytosis 吞噬），并排泄到血管内皮以下的部位。久而久之，血管内皮以下的区域变成了血管的“垃圾场”。开始，局部的“垃圾清理工”（医学上称其为巨噬细胞macrophage) 还可以把这些“垃圾”(LDL-C)吃掉并消化掉。然而当“垃圾太多”，吃完后消化不了，于是，这些细胞就变成了—个个储存“垃圾的仓库”（医学上称其为泡沫细胞，foam cell)。于是，使血管局部变得像“米粥”样的结构，这就是典型“动脉粥样硬化”的形成过程。同时血管硬化、脆弱、无弹性，血流经过时极易形成涡流，最后把血管内皮冲破，导致血栓的形成，阻塞了血管，这就是“心肌梗死”与“脑中风”的典型形成过程。尽管有很多因素参与这些过程，但胆固醇在体内过度积聚被目前主流医学看作是导致动脉粥祥硬化、高血压、心肌梗死与脑中风最开始的元凶。

 

三、现代医学是如何干预人体的胆固醇代谢的

既然胆固醇在体内积聚是导致人类最主要的致残致死性疾病的“始作俑者”，现代医学以“减少胆固醇的来源”为其主要任务，预防或延缓上述疾病的发生。例如，他汀类药物(statin), 包括辛伐他汀(Simvastatin) 、洛伐他汀(Lovastatin)等，就是通过抑制肝细胞合成胆固醇，降低血浆胆固醇。依折麦布(Ezetimibe）则抑制胆固醇经肠道的吸收，从而降低血浆胆固醇。这两类药物经多年的应用，被证明能够降低血脂，并能够减少心脑血管并发症的发生。遗憾的是，最近发现这些药物单独应用时，实际效果并不理想，原因是当抑制了胆固醇的合成时，胆固醇经肠道的吸收增多；而当抑制胆固醇的吸收时，肝脏合成胆固醇的能力又代偿增加，这些都抵消了药物的作用。当两类药物组合应用时，效果确实增强了，可遗憾的是，这两类药物都有一定的毒副作用，都可对肝脏或肌肉造成损害。也就是说，对于不少患者来说，用药剂量低了的话，疗效不理想，而剂量高了或配合起来用，又出现更严重的危害。虽说有这样和那样的不足，可患者还得用，因为患者没有其他的选择。所以，能够找出确实安全有效地降低血浆胆固醇或“坏脂肪”的药物或保健品，是世界各国的民众，特别是老年朋友梦寐以求的事情。

 

四、普洱茶抑制胆固醇的吸收与合成

一般人认为普洱茶只是一种“茶”，它能够降低血浆的胆固醇吗？国际上的药物公司巨头，花了很多钱，费了很多年的时间研发的药物都不能完全解决这一难题，难道普洱茶就管用吗？为了得到相关答案，本研究就应用普洱茶，对受试动物胆固醇的吸收与合成的影响进行了研究。

（一）普洱茶对胆固醇的吸收影响研究

材料

普洱茶茶样（见引言）主要试剂，对照EzeLimibe依折麦布（由国外某制药公司提供、Simvastatin辛伐他汀降脂药物（由杭州某制药公司提供、肠黏膜细胞系(Caco2)与肝脏细胞系(HepG2)(由北大学医学部提供）

方法

选用由北京大学医学部动物部提供的体重为250~300g,三月龄的SD大鼠为试验动物，雌雄各半。所有动物饲养于维通利华公司动物部SPF级动物室，12/12小时明暗交替环境，自由进食。动物室温度保持在25℃,相对湿度65%,每天更换垫料和饮水，每隔2天更换消毒鼠笼。所有动物试验操作均按北京实验动物管理条例执行(fol1ow NIH guidelines)。

SD大鼠在SPF级动物实验室饲养4周后，随机分为以下试验组，并分别通过口服灌胃给予不同的普洱茶水浸提物。空白对照组(Contro l group): 10只，大鼠以常规（非高脂）饲料饲喂1周后，开始灌胃蒸馏水，0.5ml/(日·只），连续28天，灌胃期间始终给予常规饲料：高脂模型组(Hyperlipcdemia diet group,HLD):10只，大鼠以高脂饲料饲喂l周后，开始灌胃蒸馏水，0.5ml/(日• 只），连续28天，期间始终给予高脂饲料；阳性药物对照组- 1（Ezetimibe group):10只，大鼠以高脂饲料饲喂1周后，开始灌胃胆固醇吸收抑制剂Ezetimibe,10mg/(kg.bw）,连续28天,期间始终给予高脂饲料；阳性药物对照组-2(辛伐他汀，Simvastatin group)：10只，用高脂饲料饲喂大鼠l周后，给予胆固醇合成抑制剂，辛伐他汀，Simvastatin 20mg/(kg.bw），连续28天，期间始终给予高脂饲料：不同剂量的普洱茶饲喂组[低、中、高剂量分别为125mg/(kg•bw)、250mg/(kg•bw)、500mg/(kg•bw)]用高脂饲料饲喂大鼠1周后，给予普洱茶水浸提物，期间给予高脂饲料。灌胃期间，留取血浆，测血浆中LDL-C胆固醇的含量。同时对在代谢笼饲养的试验动物收集粪便。测定粪便中的胆固醇含量,比较血浆胆固醇与粪便中胆固醇含量的变化。

各组试验大鼠灌胃4周后，乙醚麻醉，眼眶取血，肝素抗凝。将部分肝素抗凝血液离心，3000rpm,离心30min。取血浆分装到EP管中，分2管，每管100u1,置于-60℃冰箱保存，待测。

试验首先测定血浆中总胆固醇含量，然后采用聚乙烯硫酸盐选择性地沉淀血清中低密度脂蛋白，而上清液中含有极低密度蛋白与高密度脂蛋白。用总胆固醇减去上清液中的胆固醇，取得血浆中低密度脂蛋白的含量。测定总胆固醇、血浆LDL-C血浆总胆固醇－上清液的胆固醇。对结果进行分析统计。

试验研究结果

普洱茶能够抑制肠道对胆固醇的吸收、同时升高粪便中胆固醇的含量

食物中的胆固醇经由肠黏膜吸收入血，肝肠循坏中的胆固醇也需要通过肠黏膜吸收入血。通常，人类食物当中动物来源的食品，如肉类、鸡蛋黄等，大多含有大量的胆固醇。如果没有消化功能的紊乱、没有肠黏膜细胞的大范围损伤，食品中的胆固醇大多被吸收入血。目前未发现人体有明显的限制胆固醇吸收机制存在。因而，长期食用肥甘厚腻的食品，体内（血、肝脏或脂肪组织）胆固醇积聚几乎是不可避免的现象。抑制胆固醇吸收的制剂具有重要的保健意义。

本试验给大鼠饲喂高脂饲料，一周内即造成大鼠的高脂血症和高胆固醇血症，然后开始给高脂血症的大鼠饲喂不同剂量的普洱熟茶和普洱生茶水浸提物。同时使用临床最常用降脂药辛伐他汀，两周后，结果显示，普洱生茶与熟茶都可以显著降低血浆胆固醇。与此同时、粪便中的胆固醇含量变化较大，其原因是粪便的收集较困难，不如血液的收集那样准确定量。（图12-1）.

（二）普洱茶对胆固醇的合成影响研究

除了从食物中消化吸收胆固醇外，人体还可以合成胆固醇。当食物中缺乏胆固醇时，机体就加快自身的合成，来代偿外源供给的不足。肝脏是胆固醇的主要合成工厂，肝细胞具有完备的合成酶体系。胆固醇的合成是由多个步骤完成的，像一个工厂的生产流水线，多数合成步骤都可快速完成。但其中有一个步骤，速度很慢，成为整个流水线的瓶颈或限速步骤，催化这一个步骤的酶被称为β-羟-β-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA Reductase) 。如果抑制了这个酶的活性，那么整个胆固醇合成的量就会大大下降。现代医学中，他汀类药物的作用靶点就是这个酶，抑制了这个酶就能降低血浆胆固醇。因此，本研究主要观察普洱茶是否能够抑制这个酶而降低血浆胆固醇。

 

材料 

普洱茶茶样（见引言）主要试剂“肝脏细胞系HepG2”(来源于北京大学医学部）胆固醇合成限速酶HMG-CoA的ELISA试剂盒与微量液体样本胆固醇含量测定试剂盒（外购获得）。

方法

HepG2 是肝细胞系，具有肝细胞的正常结构功能与代谢。本研究将HepG2细胞培养于96孔细胞培养板中，细胞培养液中不含有任何形式的胆固醇。然后将不同浓度的普洱茶提取物溶解于细胞培养液中，在细胞培养箱中，经过24小时的培养，细胞合成了胆固醇。有的胆固醇合成后释放到培养液中，有的胆固醇只存储于细胞内。因此，本研究将细胞裂解后与细胞培养液一道，测量其胆固醇的含量。

试验研究结果

1.普洱茶提取物能够显著抑制HepG2细胞内胆固醇的合成活性

结果显示，胆固醇合成抑制剂Simvastatin(终浓度分别为1.Oug/mL、1O.Oμg/mL、100.μg/mL)时，显著抑制肝细胞系HepG2) 合成胆固醇的活性。同样，普洱茶水提取物也具有显著抑制胆固醇合成的活性（图12-2)。

本研究将肝细胞(HepG2)按照1.0X105cells/mL的密度接种于96孔板中,体外培养24小时后，将细胞分为空白对照组、Simvastatin低剂量阳性药物对照组(l.Qμg/mL)Simvastatin 中剂量阳性药物对照组(10.0μg/mL)、Simvastatin 高剂量阳性药物对照组(100.Oμg/

mL)、低剂量普洱茶组(1.Qμg/mL)、中剂量普洱茶组(10.0μg/mL)、高剂量普洱茶组（lOO.Oμg/mL)。作用24小时后，裂解细胞，并用胆固醇测定试剂盒测定细胞上清裂解液中的胆固醇含量。结果发现，三个剂量的阳性药物Simvastatin均能够显著抑制HepG2细胞内胆固醇的合成活性，而普洱茶提取物的中高剂量组也能够显著抑制HepG2细胞内胆固醇的合成活性。

2.普洱茶能够抑制肝细胞中胆固醇合成酶的表达或产生而发挥降低血浆胆固醇的作用

以上两个研究证明了普洱茶水提取物能够抑制肝细胞合成胆固醇的能力。他汀类药物能够催化胆固醇合成酶β-羟-β-甲基戊二酰辅酶A还原酶（HMG-CoA Reductase)的活性。普洱茶水提取物中几乎不含有他汀类化合物或类似物，如果不是抑制了这个酶的活性，是否抑制了胆固醇合成酶的表达。本研究又考察了肝细胞中胆固醇合成酶，β-羟-β-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA Reductase)的表达，通过酶联免疫分析(ELISA)结果表明，Simvastatin(终浓度分别为1.0ug/mL、10.Oug/mL\100.0μg/mL) 虽然抑制了胆固醇的合成，但并不抑制HMG-CoA Reductase 酶蛋白的表达。而普洱茶水提取物（终浓度分别为10.0-100.0μg/mL能够显著抑制HMG-CoA Reductase酶蛋白的表达。结果表明，虽然普洱茶提取物和Simvastatin 都能抑制胆固醇的合成，但可能它们二者的作用原理并不相同，Simvastatin主要是通过抑制HMG-CoA Reductase酶的活性，而普洱茶水提取物则可能是通过抑制HMG-CoA Reductase酶的表达或产生而发挥作用（图12-3)。

五、普洱茶应用于干预胆固醇吸收与合成的优势分析

现代医学研究证明，导致肥胖症、高血压、动脉粥样硬化以及冠心病的主要危险因素是高脂血症。临床上，通过降低血脂，特别是降低血浆中的低密度脂蛋白胆固醇LDL-C的含量能够减轻动脉粥样硬化的程度，减少冠心病的发病率。即降低血浆中的LDL-C是预防动脉粥样硬化、高血压以及冠心病的有效方法之一。

目前，在临床医疗实践中，主要采用抑制肝脏合成胆固醇的方法。肝脏合成胆固醇的主要催化酶为β-羟-β-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoA Reductase)。抑制HMG-CoA还原酶的药物为“他汀”(statin)类药物，其中包括辛伐他汀(Simvastatin)、洛伐他汀(Lovastatin)、普伐他汀(Pravastatin)等等。

然而，近年来临床观察发现，不少患者使用他汀类药物后，并没有显示出明显的临床疗效。据报道，有52%的患者在用药的开始阶段效果不明显，其中，86%的患者在用药6个月后仍然不能达到治疗目标。特别是，许多患者用药后出现肝脏与骨骼肌组织损伤的毒副作用。这些结果提示，需要寻找更加有效，安全的药物或手段来控制LDL-C的水平。

 

另外一种降低血浆LDL-C水平的策略是抑制小肠黏膜对胆固醇的吸收。近年来，国际上出现了一种新的药物，即Ezetimibe,它能够抑制肠黏膜对胆固醇的吸收。特别是Ezetimibe与他汀类药物合用，不仅能够增强他汀类药物的疗效,达到降低LDL-C与预防和减少冠心病发作的目的，还能降低他汀类药物的使用剂量，从而降低其毒副作用。

本研究结果提示，普洱茶可抑制肠黏膜胆固醇的吸收与抑制肝脏胆固醇的合成，两种方法合并应用，双管齐下，被实践证明是一种确实有效、安全可靠的治疗手段。

本课题组前期通过动物试验证明，普洱茶的提取物能够降低血浆LDL-C的水平，但是，普洱茶是通过何种途径、何种作用原理达到降低血浆LDL-C含量的作用，是通过抑制了胆固醇的吸收，还是抑制了肝脏胆固醇的合成？迄今为止，没有发现相关的研究报道。

 

而本研究证明普洱茶水提取物既有抑制胆固醇吸收的作用，又有抑制胆固醇合成的作用。不仅从科学实验的角度证明了民间所观察到的现象，也为普洱茶的合理使用提供了科学的佐证，为许许多多患高胆固醇血症的患者或想要防止胆固醇增高的人群提供了一种新的辅助手段。这种方法可能并没有他汀类药物和Ezetimibe合用的效果强，但是它可以在日常生活中方便地完成，假如，有一些患者不能耐受他汀类化合物的毒副作用，是否可以用普洱茶的提收物进行辅助治疗，显然，值得深入研究。